做植物的蛋白质分离纯化的工作怎么样?了解的提点建议,多谢!
这个你有必要去了解下电泳的原理，事实上，胶体具有电泳现象，而蛋白能是一种生物大分子，能够配成胶体溶液。电泳时，通过一定手段（加热等）使蛋白质带上电荷，那样在电场中能够定向移动。
，合适的pH pH的剧烈变化，或者极高极低的环境pH值容易总成蛋白质变性。在分离纯化时，因为不同层析柱的需求，可能会需要调节pH。使用较低浓度的盐酸或者氢氧化钠调节pH有助于保持蛋白的稳定性。
常见的分离提纯蛋白质的方法有： 盐析与有机溶剂沉淀：在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以破坏蛋白质的胶体性质，使蛋白质从溶液中沉淀析出，称为盐析。常用的中性盐有：硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等。盐析时，溶液的pH在蛋白质的等电点处效果最好。
其与盐溶液一样具有脱水作用；其有机溶剂的介电常数比水小，导致溶剂的极性减小。蛋白质沉淀剂：蛋白质沉淀剂仅对一类或一种蛋白质沉淀起作用，常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。聚乙二醇沉淀作用：聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。
常用的蛋白质纯化方法有离子交换色谱、亲和色谱、电泳、疏水色谱等等 离子交换色谱：蛋白质和氨基酸一样会两性解离，所带电荷决定于溶液pH。pH小于pI时蛋白质带正电，pH大于pI时蛋白质带负电。不同蛋白质等电点的蛋白质在同一个溶液中，表面电荷情况不同。
蛋白质纯化技术的介绍
蛋白质纯化技术工作较为复杂，从细胞中提取的蛋白质或从含有蛋白质的溶液中经过沉淀、梯度离心、盐析等方法得到的蛋白质经常含有杂质，要去除这些杂质，同时又要保持蛋白质的生物学活性。
盐析法：盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中，溶解度会随盐浓度的增高而上升，但当盐浓度增高到一定数值时，使水活度降低，进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。
蛋白质分离纯化常用方法有：沉淀，电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。
为什么蛋白质纯化员好呢,他那工资不高,工艺员那个公司是个合资的_百...
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为什么要进行蛋白质的分离纯化与鉴定
是根据蛋白质的理化性质将蛋白从组织或细胞中分离出来获得纯度较高的蛋白 提取就是将蛋白从组织里用一定的方法分离出来；一般植物组织或是动物组织中都有脂肪，核酸等物质，提取液中含有大量杂质，分离即是将蛋白与这些杂质分离开；纯化是为了将分离过程中残留的那部分杂质去除，进一步提高蛋白纯度。
因为我们通常得到的蛋白初级都是由菌体发酵而来的，得到的蛋白多是有很多杂蛋白（可以通过SDD-PAGE电泳直接看到），所以对于我们需要的目的蛋白需要通过具体的纯化过程，蛋白的纯化也是根据目的蛋白的特性来进行具体纯化，通常有离子交换，亲和等。如果目的蛋白含有标签蛋白还可以通过金属螯合层析纯化。
分子大小的魔术师透析与超滤，如同魔法师的手杖，轻挥间分离大分子与小分子；离心分离，以分子大小的精确分层，揭示沉降与扩散的秘密；凝胶过滤，如丝滑滤网，滤过出每一份独特的分子重量。形状的舞者 球状蛋白的舞步，影响着它们在空间中的分布，沉降速度与扩散路径因此各异。
利用这一性质 利用这一性质，可以选择适当的溶剂将蛋白质从混合物中提取出来。分子量和分子量分布：蛋白质的分子量和分子量分布是决定其物理和化学性质的重要因素。通过凝胶色谱法、等方法，可以根据蛋白质的分子量和分子量分布进行分离纯化。
分离纯化蛋白质的方法及原理（一）利用分子大小透析：将待提纯蛋白质放在透析袋中放在蒸馏水中进行。原理：利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质，使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开。
为什么要对蛋白质纯化
因为我们通常得到的蛋白初级都是由菌体发酵而来的，得到的蛋白多是有很多杂蛋白（可以通过SDD-PAGE电泳直接看到），所以对于我们需要的目的蛋白需要通过具体的纯化过程，蛋白的纯化也是根据目的蛋白的特性来进行具体纯化，通常有离子交换，亲和等。如果目的蛋白含有标签蛋白还可以通过金属螯合层析纯化。
对蛋白质分子进行分析。蛋白质是组成人体一切细胞、组织的重要成分。由于其体内含有大量分子，为了对蛋白质分子进行分析，所以要进分离纯化与鉴定，蛋白质约占人体全部质量的18%，最重要的还是其与生命现象有关。
是根据蛋白质的理化性质将蛋白从组织或细胞中分离出来获得纯度较高的蛋白 提取就是将蛋白从组织里用一定的方法分离出来；一般植物组织或是动物组织中都有脂肪，核酸等物质，提取液中含有大量杂质，分离即是将蛋白与这些杂质分离开；纯化是为了将分离过程中残留的那部分杂质去除，进一步提高蛋白纯度。
原***白表达纯化是为了什么?
蛋白质表达、分离、纯化可以：（1）探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理；（2）供作结构与功能的研究；（3）作为催化剂、营养剂等。
用原核生物来表达主要还是因为操作简单，快速。如果希望表达和纯化的蛋白性质稳定，经原核系统表达之后仍然有正确的折叠构象，那么使用原核表达系统就很合适了。
Novagen 的 pET 系统不断扩大，提供了用于表达的新技术和选择，目前共包括 36 种载体类型、 15 种不同宿主菌和设计用于有效检测和纯化目标蛋白的许多其它相关产品。
