T载上连接2000bp的目的片段,请问怎么测序,谢谢!!
1、如果DN段在载体上，可以用载体上两端的引物同时测序，让其中间交叉互补，便可完全测通。如果这样还读不通，可在已经测出序列的450～500个碱基处设计测序引物作进一步测序（此称为Primer Walking法），便可完全测序。
2、反向测序：就是用下游引物做测序引物往上测序。正向测序：就是用上游引物做测序引物往下测序。双向：就是正反两头同时测 测通：就是得到全场序列。一般超过1600bp的需要设计中间引物才可以测通。
3、测序订单上目的片段长度即你扩增的基因片段大小。
4、对PCR产物测序需要怎么准备样品 把目的片段连接到T载体上，然后转化到感受态细胞中培养，鉴定阳性菌落，培养转化好菌落，将提取质粒再做一下鉴定（酶切或PCR）。把阳性的质粒或菌液寄给测序公司就ok了。
M13通用引物的设计是针对M13噬菌体的那一段基因?即质粒中有M13的那一...
1、M13噬菌体是一种丝状噬菌体，内有一个环状单链DNA分子，长6407个核苷酸，含DNA***和噬菌体增殖所需的遗传信息。M13DNA的***起始位点定位在基因间隔区内。
2、【答案】：M13噬菌体载体是基于大肠杆菌M13丝状噬菌体基因组构建的载体，在M13噬菌体基因组基因间隔区中插入β-半乳糖苷酶N端一小段编码序列(内插入若干限制性内切酶的单一切点)及其调控序列。
3、M13载体的特点：使克隆的DN段以特定单链的形式输出受体细胞外这在DNA定向突变中非常有用 ；M13重组分子筛选简便；但M13噬菌体载体的最大缺陷是装载量小，只有5 kb。
4、RF DNA 很容易从感染细胞中纯化出来，可以象质粒一样进行操作，并可通过转化方法再次导入细胞。
5、M13噬菌体是一类特异的雄性大肠埃希菌噬菌体，基因组为一长度4kb的且彼此同源性很高的单链闭环DNA分子。只感染雄性大肠埃希菌，但M13噬菌体DNA可以转传导进入雌性大肠埃希菌。
DNA测序仪的试剂器材
1、（1）SILVER SEQUENCETM DNA测序试剂盒。
2、高压电泳仪，测序用电泳槽，制胶设备，PCR仪。
3、【试剂与器材】1．BigDye测序反应试剂盒 主要试剂是BigDye Mix，内含PE专利四色荧光标记的ddNTP和普通dNTP，AmpliTaq DNA polymerase FS，反应缓冲液等。2．pGEM-3Zf (+) 双链DNA对照模板 0.2g/L，试剂盒配套试剂。
4、批准了BGISEQ-1000基因测序仪、BGISEQ-100基因测序仪和胎儿染色体非整倍体（T2T1T13）检测试剂盒（联合探针锚定连接测序法）、胎儿染色体非整倍体（T2T1T13）检测试剂盒（半导体测序法）医疗器械注册。
5、乃至生命科学诸多方向的基础研究和应用研究方面具有重要实用价值。
